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淺析臺式超高速離心機的分離方法

更新時間:2019-04-28點擊次數(shù):2382
   淺析臺式超高速離心機的分離方法
  一:臺式超高速離心機差速離心:逐次增加離心力,每次可沉降樣品溶液中的一些組份。
  差速離心是一種常用的方法。在這種方法中,離心管在開始時裝滿了均一的樣品溶液。通過在一定速度下一定時間的離心后,就可得到兩個部份:沉淀和上清液。通常在次離心時把大部分不需要的大粒子沉降去掉。這時所需的組份大部分仍留在上清液中。然后將收集到的上清液以更高速度離心,把所需的粒子沉積下來。離心的時間要選擇得當,使大部份不需要的更小的粒子仍留在上清液中。對于得到的沉淀和上清液可以進行進一步的離心,直到達到所需要的分離純度為止。
  差速離心的特點是操作簡單,但分離純度不高。
  臺式超高速離心機分離方法
  二:密度梯度離心法:可以同時使樣品中幾個或全部組份分離,具有很好的分辨率。
  (1)速率區(qū)帶法:
  根據(jù)樣品中不同粒子所具有的不同的尺寸大小及沉降速度(S)。大致步驟如下:
  在離心管中裝入密度梯度溶液,溶液的密度從離心管頂部至底部逐漸增加(正梯度)。
  臺式超高速離心機將所需分離的樣品小心地加至密度梯度溶液的頂部。樣品在梯度溶液表面形成一負梯度。
  由于不同大小的粒子在離心力作用下,在梯度中移動的速度不一樣,所以經(jīng)過離心后會形成幾條分開的樣品區(qū)帶。
  注意:樣品粒子的密度必須大于梯度液注中任一點的密度。離心過程必須在區(qū)帶到達管子底部前停止。
  (2)等密度離心法:
  根據(jù)粒子的不同密度來分離。離心過程中,粒子會移至與它本身密度相同的地方形成區(qū)帶。
  密度樣度的選擇要使梯度的范圍包括所有待分離粒子的密度。樣品可以在密度梯度液粒上面或均勻分布在密度梯度中。經(jīng)離心后,樣品粒子達到它們的平衡點。
  注意:臺式超高速離心機平衡后粒子的分離*由其密度決定,與時間無關(guān),此時再改變離心轉(zhuǎn)速,只能改變區(qū)帶的相對位置。
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